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引物長度一般為15-30bp，不能大于38bp。引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近。引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3的下降形狀也有利于引物與模板的結合。
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引物長度一般為15-30bp，不能大于38bp。引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近。引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3的下降形狀也有利于引物與模板的結合。
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引物長度一般為15-30bp，不能大于38bp。引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近。引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3的下降形狀也有利于引物與模板的結合。
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ncbi中primer-blast使用方法是什么，rimer-BLAST的輸入Primer-BLAST界面包括了Primer3和BLAST的功能。提交的界面主要包括三個部分：targettemplate（模板區）,theprimers（引物區）,和specificitycheck（特異性驗證區）。跟其它的BLAST一樣，點擊底部的“Advancedparameters”有的參這個工具整合了目前流行的Prim
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